GENETIC DIVERSITY OF Lutzomyia (Nyssomyia) intermedia IN AN ENDEMIC AREA OF AMERICAN CUTANEOUS LEISHMANIASIS, STATE OF PARANÁ, BRAZIL / Diversidad genética de Lutzomyia (Nyssomyia) intermedia en un área endémica de leishmaniasis cutánea americana del estado de Paraná, Brasil

ABSTRACT Lutzomyia intermedia (Diptera: Psychodidae) features as one of the main vectors that are involved in the transmission of American cutaneous leishmaniasis (ACL) in the Neotropical region. However, genetic studies involving this taxon are still incipient and important for understanding the level of variability of different populations, their role, and implications as vectors. The aim of this study was to determine the level of genetic diversity of L. intermedia present in the Ribeira River Valley, an area of ACL transmission in the state of Paraná, Brazil, through the Random amplified polymorphic DNA (RAPD). Two municipalities were chosen to collect sand flies: Cerro Azul (new transmission area of the ACL) and Adrianópolis (endemic area of the ACL). The insects were captured in the house, in the peridomicile and in the wild (forest). Two of the used markers made it possible to estimate the polymorphism of the studied populations, resulting in 40 genotypes, most of them from peridomicile. The dendrogram generated by the analysis with the primer A10 showed different degrees of similarity, suggesting that there may be gene flow in the studied populations. The Principal Coordinate Analysis (PCO) with the A2 primer, was useful in grouping L. intermedia according to its ecological and geographical origin. There was no distinction between the lineages composing the L. intermedia complex. The results of this study, with the record of great genotypic diversity in L. intermedia, may contribute to explain the maintenance of the life cycle of Leishmania braziliensis (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) in the region.

RESUMEN Lutzomyia intermedia (Diptera: Psychodidae) es uno de los principales vectores que participan en la transmisión de leishmaniasis cutánea americana (LCA) en la región Neotropical. A pesar de que aún los estudios genéticos que involucran a este taxón son incipientes, tienen una gran importancia para comprender el nivel de variabilidad de las diferentes poblaciones y sus implicaciones en su papel vectorial. El objetivo de este estudio fue determinar el nivel de diversidad genética de L. intermedia presente en el Valle del Río Ribeira, área de transmisión de LCA en el estado de Paraná, Brasil, mediante RAPD (ADN polimórfico amplificado aleatoriamente). Los flebótomos fueron recolectados en los municipios Cerro Azul (nueva área de transmisión de LCA) y Adrianópolis (área endémica de LCA), donde fueron capturados en ambientes residenciales, en el peridomicilio y en el bosque. Dos de los marcadores utilizados permitieron estimar el polimorfismo en las poblaciones estudiadas con la obtención de 40 genotipos, la mayoría de ellos en el peridomicilio. El dendrograma generado por el análisis con el cebador A10 mostró diferentes grados de similitud, lo que sugiere que puede haber flujo gènico en las poblaciones. El Análisis de Coordenadas Principales (PCO) con el cebador A2 fue útil para agrupar L. intermedia según su origen ecológico y geográfico. No hubo distinción entre los linajes que componen el complejo L. intermedia. Los resultados de este estudio, con el registro de gran diversidad genotipica en L. intermedia, pueden contribuir a explicar el mantenimiento del ciclo biológico de Leishmania braziliensis (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) en la región.

Abundancia y diversidad de vectores (Diptera: Psychodidae) en área de transmisión antigua de Leishmaniasis Cutánea en el nuevo mundo después de la construcción del gasoducto Bolivia-Brasil / Abundance and diversity of vectors (Diptera: Psychodidae) in an old transmission area of cutaneous leishmaniasis in the new world after Bolivia-Brazil gas pipeline construction

The objective of this study was to determine the abundance and diversity of the species and their presumed vectorial role in the transmission of Cutaneous Leishmaniasis (CL). Research on sand flies (Diptera: Psychodidae) was carried out in two municipalities in the Ribeira River Valley in the State of Paraná, southern Brazil. One, Adrianópolis, is an endemic area of CL and the other is a recent outbreak area (Cerro Azul). A total of 432 specimens were collected from residential, peri-domestic and wild environments. According to the data obtained, for each ecotope studied, the statistical analysis has shown that two lines of the Lutzomyia intermedia population coexist and that the quantity of specimens from L. intermedia s.l. is significantly different from L. intermedia s.s. in all environments (χ2=9.943; DF=2; p=0.07). The prevalence of L. intermedia (93.28%) in the ecotopes studied suggests that it is the main vector of leishmaniasis. The succession of vector species and their involvement in the epidemiological cycle of L. braziliensis is discussed in this article(AU)

El objetivo de este trabajo fue determinar la abundancia y diversidad de las especies y su supuesto papel vectorial en la transmisión de Leishmaniasis Cutánea (LC). La investigación sobre flebótomos (Diptera: Psychodidae) se llevó a cabo en dos municipios en el Valle del Río Ribeira en el Estado de Paraná, sur de Brasil. Las regiones estudiadas fueron Adrianópolis, área endémica de LC, y Cerro Azul, que se reporta como zona de brote reciente. Se recolectaron un total de 432 especímenes de ambientes residenciales, peri-domésticos y silvestres. El análisis estadístico realizado, a partir de los datos obtenidos para cada ecotopo estudiado, mostró que coexistían dos linajes de la población de Lutzomyia intermedia y que la cantidad de especímenes de L. intermedia s.l. fue significativamente diferente de L. intermedia s.s. en todos los entornos (χ2=9,943; GL=2; p=0,07). La prevalencia de L. intermedia (93,28%) en los ecotopos estudiados sugiere que es el principal vector de la leishmaniasis. La sucesión de especies de vectores y su participación en el ciclo epidemiológico de L. braziliensis se discute en este artículo(AU)

A mesmice identitária: a (im)possibilidade de emancipação na política de assistência social / La mismidad de identidad: la (im)posibilidad de emancipación en la política de asistencia social / The sameness of identity: the (im)possibility of emancipation in social assistance policy

Resumo O artigo reflete resultados de duas pesquisas de iniciação científica que tiveram o escopo basilar da teoria psicossocial proposta pelo professor Ciampa, que concebe a identidade enquanto metamorfose humana em busca de emancipação. Esse enfoque teórico metodológico possibilitou um entendimento conceitual crítico sobre aspectos relevantes da política nacional de assistência social e a inserção da psicologia nessa produção. Para o intento foi pesquisada a construção identitária de psicólogos e cidadãos usuários dos Centros de Referência de Assistência Social (CRAS), utilizando-se métodos qualitativos com ênfase nas entrevistas de história de vida. Dentre os fragmentos analisados destaca-se a percepção do psicólogo sobre sua identidade profissional (angústias e dificuldades sistêmicas que entravam suas práticas emancipatórias); em relação aos cidadãos usuários, percebe-se a falta de compreensão sobre o ideário da política, o não reconhecimento da psicologia enquanto prática comunitária e o conformismo e a resignação diante das precariedades vividas.

Resumen Este artículo analiza los resultados de dos investigaciones que se apoyaron en la teoría psicosocial propuesta por Ciampa, que concibe la identidad como metamorfosis humana en la búsqueda de emancipación. Este enfoque permitió una comprensión conceptual crítica sobre aspectos relevantes de la Política Nacional de Asistencia Social y la inserción de la Psicología en esta producción. Se investigó la construcción de la identidad de psicólogos y de ciudadanos usuarios de los Centros de Referencia y Asistencia Social (CRAS), utilizando métodos cualitativos, con énfasis en las entrevistas de Historia de Vida. Entre los fragmentos analizados, se destaca la percepción del psicólogo acerca de su identidad profesional (la angustia y las dificultades sistémicas que obstaculizan sus prácticas emancipatorias). Con relación a los ciudadanos usuarios, se perciben la falta de comprensión sobre el ideario de la política, el no reconocimiento de la Psicología como práctica comunitaria y la conformidad y resignación ante las precariedades que han experimentado.

Abstract The article reflects results of two pieces of scientific initiation research that had the basic scope of the psychosocial theory proposed by professor Ciampa, which conceives identity while human metamorphosis in search for emancipation. This theoretical methodological approach enabled a critical conceptual understanding of relevant aspects of the national policy on social assistance and the insertion of psychology in this production. For this purpose, the identity construction of psychologists and user citizens of the Social Assistance Reference Centers (CRAS) was researched with the use of qualitative methods with emphasis on life story interviews. Among the analyzed fragments, the perception of the psychologist of his/her professional identity (the anguish and systemic problems that hinder his/her emancipatory practices) stands out; as for the user citizens, the observed fragments are lack of comprehension of the policy ideas, the non-recognition of psychology as a community practice, and the conformity and resignation towards the experienced precariousness.

Estandarización de la técnica de PCR-RFLP de la región ITS1, para la caracterización molecular de leishmania (L) infantum, en muestras caninas / Standardization of PCR-RFLP technique of the ITS-1 region for leishmania (L) infantum molecular characterization in canine samples

La leishmaniasis es una enfermedad producida por protozoarios parásitos del género Leishmania. Estos parásitos infectan a hospedadores mamíferos, entre los cuales los perros han sido implicados como reservorios del parásito. Este trabajo planteó estandarizar la técnica de la PCR-RFLP luego de la amplificación de la región ITS1 de Leishmania spp, como herramienta útil para la detección y caracterización molecular. Se utilizaron promastigotes de cultivo y muestras de biopsias procedentes de perros con leishmaniasis visceral previamente diagnosticados en el Centro Antirrábico Nacional. La región ITS1 del ADN genómico nuclear de Leishmania spp. fue amplificada utilizando los cebadores LITSR y L5,8S. La técnica ITS1 PCR-RFLP aplicada, permitió la detección de Leishmania (L) infantum en 10/10 aislados de parásitos mantenidos en medio NNN, en 10/18 muestras de bazo y 10/18 muestras de ganglio linfático poplíteo. Las condiciones óptimas de reacción fueron 0,2 mM de dNTPs, 0,1 pmol de cada cebador y 1U de Taq polimerasa. La sensibilidad de la PCR fue de 3 ng/µL de ADN en aislados de cultivo NNN y 60 ng/µL de ADN en muestras de biopsias, mientras que la especificidad fue de 100% para la detección de Leishmania sp. La enzima de restricción Hae III, determinó fragmentos de 184, 72 y 55 pb., que resultaron específicos para la especie Leishmania (L.) infantum. El marcador utilizado resultó confiable para la detección y caracterización de Leishmania sp. en perros procedentes de zonas endémicas, lo cual podría ser útil para verificar las especies de parásitos circulantes entre los perros.

Leishmaniasis is a disease caused by protozoan parasites of the genus Leishmania. The separasites infect to mammalian hosts, including canines that have been implicated as reservoirs of the parasite. The aim of this research was to standardize the technique of PCR RFLP after amplification of the ITS1 region of Leishmania (Leishmania) infantum, as a useful tool for detection and molecular characterization. Promastigotes from culture and biopsies from dogs with visceral Leishmaniasis previously diagnosed by the Centro Antirrábico Nacional. The ITS1 region of the genomic DNA of Leishmania sp. was amplified using LITSR and L5,8S primers. The technique ITS1 PCR-RFLP applied, allowed the detection of Leishmania (L.) infantum in 10/10 of the isolates from parasites maintained in NNN culture medium, in 10/18 samples from spleen and 10/18 samples from popliteal lymph node. Optimal reaction conditions were 0.2 mM dNTPs, 0.1 pmol of each primer and 1U of Taq polymerase. The sensitivity of PCR was 3 ng/µL DNA in isolates of parasites from NNNculture medium and 60 ng/µL DNA in biopsy samples while the specificity was 100% for the detection of DNA of Leishmania sp. The restriction enzyme Hae III determined fragments of184, 72 and 55 bp., which were specific to Leishmania (L.) infantum. The marker used isreliable for the detection and characterization of Leishmania sp. in dogs from endemic areas, which could be useful to verify the species of parasites circulating among animals.